কোষ সংস্কৃতিতে ট্রান্সফারিন: সিরাম-মুক্ত সিস্টেমের জন্য একটি মূল আয়রন ক্যারিয়ার

I. ট্রান্সফারিনের কাঠামো (TF)

টিএফ-এ ৬৭৯ টি অ্যামিনো অ্যাসিড অবশিষ্টাংশ রয়েছে, যার আণবিক ওজন প্রায় ৭৯ কেডিএ এবং আইসোলেক্ট্রিক পয়েন্ট প্রায় ৬।6এর অ্যামিনো অ্যাসিড সিকোয়েন্সে 38 টি সিস্টিইন অবশিষ্টাংশ রয়েছে যা 19 জোড়া ডিসুলফাইড বন্ড গঠন করতে সক্ষম, যা প্রোটিনের কাঠামো স্থিতিশীল করার জন্য গুরুত্বপূর্ণ,এবং এটিতে তিনটি এন-গ্লাইকোসিলেশন সাইট রয়েছে. টিএফ দুটি কাঠামোগতভাবে অনুরূপ আয়রন-বন্ডিং ডোমেন নিয়ে গঠিতঃ একটি এন-টার্মিনাল ডোমেন (336 এএ) এবং একটি সি-টার্মিনাল গ্লোবুলার ডোমেন (343 এএ) । দুটি ডোমেন একটি সংক্ষিপ্ত স্পেসার ক্রম দ্বারা সংযুক্ত।

ডোমেইনের প্রতিটি Fe3+-বন্ডিং সাইটে চারটি সংরক্ষিত অ্যামিনো অ্যাসিড রয়েছে, যার মধ্যে দুটি টাইরোজিন, একটি অ্যাসপার্টিক অ্যাসিড এবং একটি হিস্টিডিন রয়েছে এবং এই অবশিষ্টাংশগুলি একটি অষ্টাক্ষর জ্যামিতিতে সাজানো হয়েছে।এছাড়াও, দুটি অক্সিজেন পরমাণু কার্বনেট আয়ন দ্বারা সরবরাহ করা হয় Fe3+-বন্ডিং সাইটগুলিতে লোহার পরমাণু স্থিতিশীল করার জন্য প্রয়োজন হয়। টিএফ বন্ডিং সাইটগুলির কাছাকাছি, Gly-65, Glu-83, Tyr-85, Arg-124, Lys-206,সের-২৪৮ এবং লিস-২৯৬ লোহার মুক্তিতে মূল ভূমিকা পালন করে. এন-টার্মিনাসের বিপরীত ডোমেইনে অবস্থিত Lys‐206‐Lys‐296 বেস জোড়ার প্রোটোনেশন প্রভাবটি TF এর খোলা বা বন্ধ কনফর্মেশনকে প্ররোচিত করতে পারে।

II. ট্রান্সফারিনের কার্যকারিতা (TF)

আয়রন কোষের বৃদ্ধি, প্রজনন এবং বিপাকীয় ক্রিয়াকলাপ বজায় রাখার জন্য প্রয়োজনীয় উপাদানগুলির মধ্যে একটি। শরীরের বেশিরভাগ মুক্ত আয়রন স্থানান্তর দ্বারা পরিবহন এবং বিতরণ করা হয়। স্থানান্তরিন (টিএফ),প্লাজমাতে প্রধান লোহা-বন্ধনকারী এবং লোহা-পরিবহনকারী β- গ্লোবুলিন, প্রধানত গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল ট্র্যাক্ট থেকে শোষিত লোহা এবং erythrocyte বিভাজন থেকে মুক্তি লোহা বহন করার জন্য দায়ী। মানব সিরাম মধ্যে TF এর ঘনত্ব প্রায় 2.5 গ্রাম / লিটার,যার মধ্যে ৩০% লোহা রয়েছেটিএফ প্রধানত তিনটি আকারে বিদ্যমানঃ হোলো-ট্রান্সফারিন (হোলো-টিএফ), আংশিকভাবে স্যাচুরেটেড ট্রান্সফারিন (সাইডেরো-টিএফ) এবং অ্যাপো-ট্রান্সফারিন (অ্যাপো-টিএফ) ।

এক্সট্রা সেলুলার কম্পার্টমেন্টে (পিএইচ ≈ 7.5), ট্রান্সফারিন রিসেপ্টর (টিএফআর) এর আয়রন-বন্ধিত টিএফ (হোলো-টিএফ) এর জন্য আয়রন-মুক্ত ফর্মের (এপিও-টিএফ) তুলনায় উচ্চতর আবদ্ধতা রয়েছে।লোহা-বন্ধিত টিএফ পরবর্তীতে অভ্যন্তরীণীকরণ করা হয়, যেখানে apo-TF কোষ পৃষ্ঠে মুক্তি পায়। এন্ডোসোমে (pH ≈ 5.6), TFR হোলো-TF এর চেয়ে apo-TF এর সাথে পছন্দসইভাবে আবদ্ধ হয়,এন্ডোসোম থেকে প্লাজমা ঝিল্লিতে এপিও-টিএফ পরিবহনের মধ্যস্থতাএই প্রক্রিয়ার মাধ্যমে, আয়রন কোষগুলিতে সরবরাহ করা হয় এবং টিএফ পুনর্ব্যবহার করা হয়।

ইন-ভিট্রো কোষ সংস্কৃতির জন্য আয়রন অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। বিভিন্ন এনজাইমের কোফ্যাক্টর হিসাবে, ট্রান্সফারিন একাধিক সেলুলার শারীরবৃত্তীয় ফাংশনে অংশগ্রহণ করে, যার তিনটি মূল দিক নীচে বর্ণনা করা হয়েছেঃ

1. কোষীয় শ্বাসযন্ত্রের বিপাকের অংশগ্রহণ
মাইটোকন্ড্রিয়া হল কোষীয় অক্সিডেটিভ বিপাকের স্থান এবং কোষের শক্তি কেন্দ্র। মাইটোকন্ড্রিয়াল ঝিল্লিতে সুসিন্যাট ডিহাইড্রোজেনাজ এই প্রক্রিয়ায় গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে।সুসিন্যাট ডিহাইড্রোজেনাসের উপাদান হিসাবে, আয়রন কোষীয় অক্সিডেটিভ বিপাক এবং শক্তি উত্পাদন জড়িত।

2অক্সিডেটিভ ক্ষতির বিরুদ্ধে কোষের সুরক্ষা
আয়রন-পর্ফাইরিন কাঠামোর কেন্দ্রবিন্দু হিসাবে, আয়রন ক্যাটালাস এবং পেরক্সাইডেসের মতো এনজাইমের একটি মূল উপাদান। এটি হাইড্রোজেন পারক্সাইড, ফেনল, অ্যামিন এবং আলডিহাইডের বিষাক্ততা দূর করে,H2O2 সহ পারক্সাইড দ্বারা সৃষ্ট ক্ষতি থেকে কোষ রক্ষাএটি কোষগুলির জন্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা প্রদান করে এবং কোষের স্বাস্থ্যের উন্নতি করে।

3. কোষ ঘনত্ব এবং জীবনযাত্রার উন্নতি
আয়রন হল কোষের প্রজননের জন্য একটি অপরিহার্য উপাদান। আয়রন ছাড়া কোষগুলি প্রজননের সময় G1 পর্যায় থেকে S পর্যায়ে অগ্রসর হতে পারে না,এবং আয়রনের ঘাটতি কোষের অ্যাপোপটোসিস এবং মৃত্যুর কারণ হয়- আয়রনের ঘাটতি কোষের প্রতিলিপির সময় ডিএনএ সংশ্লেষণকে ক্ষতিগ্রস্ত করে।কারণ আয়রন হ'ল রিবনুক্লিয়োটাইড রিডুক্টাসের একটি উপাদান ¢ রেট-সীমাবদ্ধ এনজাইম যা ডিএনএ সংশ্লেষণে রিবনুক্লিয়োটাইডকে ডিঅক্সাইরিবনুক্লিয়োটাইডে রূপান্তরিত করে.

III. সেরাম-মুক্ত সংস্কৃতিতে ট্রান্সফারিনের প্রয়োগ

ট্রান্সফারিন (টিএফ) কোষের সংস্কৃতিতে একটি অপরিহার্য উপাদান। বিশেষ করে সিরাম-মুক্ত মিডিয়াতে (এসএফএম), টিএফ বায়োম্যানুফ্যাকচারিংয়ে ব্যাপকভাবে প্রয়োগ করা হয়েছে,যেমন মোনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি উৎপাদন, পুনরায় সংমিশ্রিত প্রোটিন সংশ্লেষণ, সেইসাথে ইমিউন কোষ এবং স্টেম কোষের সংস্কৃতি।

1কোষের বৃদ্ধি এবং পণ্য উৎপাদন বৃদ্ধি
সিরাম-মুক্ত মিডিয়ামে (এসএফএম) টিএফ-এর সম্পূরক CHO কোষের উচ্চ ঘনত্বের সংস্কৃতিকে সমর্থন করে, উৎপাদন চক্র দীর্ঘায়িত করে এবং প্রোটিন ফলন বাড়ায়।
হাইব্রিডোমা কোষের জন্য সিরাম মুক্ত মিডিয়াতে টিএফ যোগ করা কোষের প্রজনন হার এবং জীবনক্ষমতা উন্নত করে।
আয়রন হোমিওস্ট্যাসিস নিয়ন্ত্রণ করে, ট্রান্সফারিন প্রোটিন গ্লাইকোফর্মের বৈষম্যতা হ্রাস করে এবং ফার্মাসিউটিকালগুলির ব্যাচ-টু-বেচ ধারাবাহিকতা নিশ্চিত করে।
যখন CAR-T কোষ, NK কোষ এবং mesenchymal stem cells (MSCs) এর সিরাম মুক্ত সংস্কৃতিতে প্রয়োগ করা হয়, তখন TF কোষের জীবনক্ষমতা এবং কার্যকরী বৈশিষ্ট্য বজায় রাখে।

2. ফর্মুলেশন সরলীকরণ এবং স্ট্যান্ডার্ডাইজেশন
আইটিএস (ইনসুলিন-ট্রান্সফারিন-সেলিনিয়াম) এবং এসপিআইটি/এসপিআইটি সহ সম্পূরকগুলির মূল উপাদান হিসাবে, টিএফ প্রাণী-মুক্ত অর্জনের জন্য সিরাম প্রতিস্থাপন করতে পারে,রাসায়নিকভাবে সংজ্ঞায়িত ফর্মুলেশন এবং প্যাচ থেকে প্যাচ বৈচিত্র্য হ্রাস.

3. রাসায়নিক chelators জন্য প্রতিস্থাপন
রাসায়নিক কেলেটর (যেমন, EDTA, সিট্রেট) রেডক্স চক্র নিয়ন্ত্রণ করা কঠিন এবং ফ্রি র্যাডিকাল উত্পাদন করতে প্রবণ।টিএফ দ্বারা আয়রন বাঁধার সুবিধা হ'ল এটি মুক্ত র্যাডিক্যালগুলি উপ-পণ্য তৈরি না করে প্রাকৃতিক রিসেপ্টর-মধ্যস্থতাকারী পথগুলির উপর নির্ভর করে.

বেইজিং অ্যান্রেট বায়োটেকনোলজি কোং লিমিটেড ইঁদুর এবং সিএইচও কোষ থেকে প্রাপ্ত শিল্পজাত প্রাণী-মুক্ত পুনরায় সংমিশ্রিত মানব ট্রান্সফারিন সরবরাহ করে। অনুসন্ধান এবং পরীক্ষামূলক পরীক্ষাগুলি স্বাগত।

গুরুত্বপূর্ণ বিজ্ঞপ্তি